將一定數量的細菌，接種于適宜的液體培養基中，在適溫下培養，定時(shí)取樣測數，以菌數的對數為縱坐標，生長(cháng)時(shí)間為橫坐標，作出的曲線(xiàn)稱(chēng)為生長(cháng)曲線(xiàn)。該曲線(xiàn)表明細菌在一定的環(huán)境條件下群體生長(cháng)與繁殖的規律。一般分為延緩期、對數期、穩定期及衰亡期四個(gè)時(shí)期，各時(shí)期的長(cháng)短同菌種本身特征、培養基成分和培養條件不同而異。
比濁法是根據細菌懸液細胞數與混濁度成正比，與透光度成反比關(guān)系，利用光電比色計測定細胞懸液的光密度(即OD值)，用于表示該菌在本實(shí)驗條件下的相對生長(cháng)量。
實(shí)驗設正常生長(cháng)、加酸抑制和加富培養等三種處理，以了解細菌在不同生長(cháng)條件下的生長(cháng)情況。
一、實(shí)驗器材
1. 活材料：大腸桿菌(E.coli)。
2. 培養基和試劑：牛肉膏蛋白胨液體培養基14支(每支10 mL)，濃縮5 倍的牛肉膏蛋白胨培養基1支。無(wú)菌酸溶液(甲酸：乙酸：乳酸=3：1：1)。
3. 器材：1 mL無(wú)菌吸管、搖床、冰箱、光電比色計、標簽等。
二、實(shí)驗步驟
1. 接種
取13支裝有牛肉膏蛋白胨培養液的試管，貼上標簽(注明菌名、培養處理、培養時(shí)間、組號)。按無(wú)菌操作法用吸管向每管準確加入0.2 mL的大腸桿菌培養液，接種后，輕輕搖蕩，使菌體混勻。另一支不接種的培養管注明CK(對照)。
2. 培養
將接種后的培養管置于搖床上，在37℃下振蕩培養。其中9支培養管分別于培養的0、1．5、3、4、6、8、10、12和14 h后取山，放冰箱中貯存，待測定。加酸處理。取出經(jīng)4h培養的另二支培養管，按無(wú)菌操作法加入1 mL無(wú)菌酸溶液，搖勻后放回搖床上，繼續振蕩培養，于培養8 h和14 h后取出放冰箱中貯存，待測定。加富營(yíng)養物處理。余下的二支培養管于培養6h后取出，按無(wú)菌操作法加入濃縮5倍的牛肉膏蛋白胨培養液1 mL，搖勻后，繼續進(jìn)行振蕩培養，于培養8 h和14 h后取出，放入冰箱中貯存，待測定。
3. 比濁
將培養不同時(shí)間、形成不同細胞濃度的細菌培養液進(jìn)行適當稀釋?zhuān)构饷芏戎翟?.0-0.4范圍內，以未接種的牛肉膏蛋白胨液體培養基調零點(diǎn)，在光電比色計上，選用400-440nm波長(cháng)的濾光片進(jìn)行比濁，從最稀濃度的菌懸液開(kāi)始，依次測定。
4. 可選步驟
將大腸桿菌接入裝有牛肉膏蛋白胨培養液的小試管中(試管要能插入放比色杯的比色槽內)。37℃下振蕩培養，分別在0、1.5 、3、4、6、8、10、12和14 h取出，以未接種培養液調零點(diǎn)，在光電比色計上比色。比色時(shí)應自制一個(gè)暗盒將培養管和比色槽罩住，以形成一個(gè)暗室。
三、繪制曲線(xiàn)
以細菌懸液的光密度值(OD)為縱坐標，培養時(shí)間為橫坐標，給出大腸桿菌在正常生長(cháng)、加酸處理和加富培養三種條件下的生長(cháng)曲線(xiàn)。
如果我們將上述培養0，1.5，3，4，6，8，10，12，14h的細菌懸液用稀釋平板測數法進(jìn)行測數，測出不同時(shí)間的含菌數，以菌懸液比濁的光密度值為橫坐標，以細菌的數量為縱坐標，繪制一標準曲線(xiàn)，這樣在測得了任一培養時(shí)間的菌懸液光密度值后，就可以在此標淮曲線(xiàn)上查出含菌數。這種方法已在工業(yè)上廣泛采用，它可以節省許多稀釋平板測數的時(shí)間， 直接用比濁法測得的光密度值查標準曲線(xiàn)以了解各個(gè)培養時(shí)期的菌數消長(cháng)情況。
如果我們將上述培養0，1.5，3，4，6，8，10，12，14h的細菌懸液用稀釋平板測數法進(jìn)行測數，測出不同時(shí)間的含菌數，以菌懸液比濁的光密度值為橫坐標，以細菌的數量為縱坐標，繪制一標準曲線(xiàn)，這樣在測得了任一培養時(shí)間的菌懸液光密度值后，就可以在此標淮曲線(xiàn)上查出含菌數。這種方法已在工業(yè)上廣泛采用，它可以節省許多稀釋平板測數的時(shí)間， 直接用比濁法測得的光密度值查標準曲線(xiàn)以了解各個(gè)培養時(shí)期的菌數消長(cháng)情況。
