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    • 創(chuàng )e慧谷42號樓B幢401室
    LoVo細胞
    LoVo細胞
    規格:
    貨期:
    編號:MZ-0111
    品牌:Mingzhoubio

    活化細胞
    凍存細胞
    熒光標記細胞

    規格:
    T25瓶
    凍存管

    產(chǎn)品名稱(chēng) LoVo細胞
    商品貨號 MZ-0111
    中文名稱(chēng) 人結腸癌細胞
    規格 T25
    組織來(lái)源 結腸腺癌;左鎖骨上淋巴結轉移;男性
    形態(tài)特征 上皮樣
    生長(cháng)特性 貼壁生長(cháng)
    特征特性 LoVo建自1971年,從診斷為結腸腺癌的56歲男性白人的一個(gè)轉移到左鎖骨上區的腫瘤結節建系。癌基因C-myc,K-ras,H-ras,N-ras,Myb,sis和fos的表達呈陽(yáng)性。癌基因N-myc的表達未做檢測。它在裸鼠中能成瘤。與107細胞聯(lián)合皮下接種5只裸鼠21天后全部成瘤。表達腫瘤特異的核基質(zhì)蛋白蛋白CC-3和CC-4。
    培養條件 F12K+10%FBS
    傳代方法 1:3傳代,2-3天換液一次
    凍存條件 無(wú)血清細胞凍存液
    細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
    細胞復蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過(guò)夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
    細胞凍存步驟 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例;1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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